液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,液相色譜儀所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
液相色譜儀成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。
液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
壓輸液系統(tǒng)由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。
1、溶劑貯存器。溶劑貯存器一般由玻璃、不銹鋼或氟塑料制成,容量為1~2L,用來貯存足夠數(shù)量、符合要求的流動(dòng)相。
2、高壓。高壓是液相色譜儀中關(guān)鍵部件之一,其功能是將溶劑貯存器中的流動(dòng)相以高壓形式連續(xù)不斷地送入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過程。
由于色譜儀所用色譜柱徑較細(xì),所填固定相粒度很小,因此,對流動(dòng)相的阻力較大,為了使流動(dòng)相能較快地流過色譜柱,就需要高壓泵注入流動(dòng)相。對泵的要求:輸出壓力高、流量范圍大、流量恒定、無脈動(dòng),流量精度和重復(fù)性為0.5%左右。此外,還應(yīng)耐腐蝕,密封性好。高壓,按其性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵兩大類。恒流泵是能給出恒定流量的泵,其流量與流動(dòng)相粘度和柱滲透無關(guān)。液相色譜儀是保持輸出壓力恒定,而流量隨外界阻力變化而變化,如果系統(tǒng)阻力不發(fā)生變化,恒壓泵就能提供恒定的流量。