超濾管是一種實驗室中常用耗材,主要用于分離和富集生物分子,如蛋白質、DNA、RNA等。它也可以用于BUFFER置換,廣泛應用于生物學、分子生物學、生化等領域的研究中。潤度生物UCT超濾離心管是一種優(yōu)秀的超濾管產品,具有的設計和優(yōu)點,下面將對其進行詳細介紹。
潤度生物UCT超濾離心管具有快速超濾功能。通過加大膜面積,小傾角結構設計能夠達到較高的濃縮倍數,輕松實現從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產物。選擇合適的超濾管是實驗成功的關鍵,而潤度生物UCT超濾管正是滿足這一需求的一款優(yōu)秀產品。
應用
1. 除鹽、滲慮或更換緩沖液
2. 濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本
3. 凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應混合液中去除引物、連接或分子標記,在HPLC之前去除蛋白質
產品選型表:
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
UCT100 | 100KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT050 | 50KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT030 | 30KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT010 | 10KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT005 | 5KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
技術參數:
不同膜的截留分子量 (MWCO) | 建議使用比要截留的蛋白質小2~3倍的規(guī)格 |
超濾膜材質 | modified polyethersulfone |
濃縮波保留管材質 | modified methyl methaciylate-acrylonitrile- butadiene- styreneplastic |
濾液接收離心管材質 | modified polypropyle |
離心管蓋子材質 | modified polyethylene |
有效膜面積 | 9.5cm2 |
長度 | 11.8cm |
直徑 | 3.5cm |
上樣量 | 12ml |
操作溫度范圍 | 0-50℃ |
使用pH范圍 | 1-14 |
離心力 | 5000xg |
滅菌 | 本超濾管未滅菌,如需無菌建議使用70%乙醇或者紫外輻照滅菌。 |
不同規(guī)格超濾管使用條件(蛋白樣本、核酸樣本)
MWCO | 推薦離心力 | 分子量 | 堿基對 | 堿基 |
3K | 3000-5000 xg | 10k-20k | 16-32 bp | 32-65 bs |
5K | 3000-5000 xg | 15k-45k | 25-78 bp | 48-143 bs |
10K | 3000-5000 xg | 30k-90k | 50-145 bp | 95-285 bs |
30K | 3000-5000 xg | 90k-180k | 145-285 bp | 285-570 bs |
50K | 3000-5000 xg | 150k-300k | 285-475 bp | 570-950 bs |
100K | 1500-3000 xg | >300k | 475-1450 bp | 950-2900 bs |
實驗流程
注意:下列步驟為針對各標準品制定的截流及回收率流程,使用者可根據自己實驗的需求進行優(yōu)化。
1. 使用超濾管前,請先使用PBS或者蒸餾水潤洗。此步驟可以濃縮倍數。
2. 加入待離心樣本,上樣量為12mL。將蓋子擰好后把超濾管放置于離心機內。將濃縮液保留管側面透明處朝向轉子中心(正視為V型結構)。此步驟可以提高效率,減少離心時間。另請注意配平以免損壞離心機。
3. 開始離心,時間及離心力根據不同規(guī)格超濾管而定,具體推薦時間及截留效果參見下列表格。
4. 離心結束后,如果樣本為蛋白質溶液,可以使用分光光度計在280 nm波長處對濾液以及濃縮液進行測量。根據離心前樣本濃度,離心后濾液及縮液濃度計算截留率和回收率。如果樣本為核酸片段,可以使用 260 nm波長測量。
MWCO | 標準蛋白(濃度) | 分子量 | 離心時間 | 截留率(%) |
3k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
5k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
10k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 15 min | >85 |
30k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >95 |
50k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >85 |
50k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 15 min | >90 |
100k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 20 min | >85 |
100k | Thyroglubulin (1 mg/mL) | 776 kDa | 30 min | >90 |